亚洲中文字幕网站你懂得,18款禁用免费安装的软件app,插在线观看网址,亚洲AV极品无码专区在线观看

網(wǎng)站首頁技術中心 > ARH-77 人外周血淋巴細胞傳代/復蘇操作
產品目錄
ARH-77 人外周血淋巴細胞傳代/復蘇操作
更新時間:2024-05-11 點擊量:565

ARH-77 人外周血淋巴細胞

,ARH77

貨號:YJ-h506(STR鑒定)

價格: 1800.0

規(guī)格: 1*106 

細胞介紹

從患有IgG漿細胞白血病的33歲女性的外周血中建立;細胞系被廣泛用作多發(fā)性骨髓瘤/漿細胞白血病的模型,但細胞明顯為EBV+,表明ARH-77可能是一種正常"B淋巴母細胞樣細胞系,而不是腫瘤細胞系.細胞的 Epstein-Barr 核抗原 (EBNA +) Epstein-Barr 病毒衣殼抗原 (EBVCA +) 呈陽性。

細胞特性

1 來源:33歲女性的 外周血

2 形態(tài):淋巴母細胞,圓形單細胞或成簇懸浮生長,部分細胞松散貼壁

3 含量:>1x106 細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理:

1) 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。                      

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備

1 準備RPMI-1640(推薦YJ-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理

1 凍存細胞的復蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法

懸浮狀態(tài)下生長的細胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加完全培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106/mL(不同細胞對密度要求不同,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。

3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗技術及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術服務:


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

亚洲国产精品无码久久98| 欧美亚洲国产大片在线看| 国内精品一区二区三区亚洲熟女乱综合一区二区 | 免费啪啪a片aaaa片老太婆交| 国产精品国产三级国快看| 久久久噜噜噜久久久蜜臀| 午夜成人免费观看福利片| 亚洲午夜未满十八勿入网站2| 久久久久久人妻毛片a片| 日本人xxxxxxxxx69| 亚洲无人区一卡2卡三卡| 久久中文字幕av第二页| 久久久久一区二区三区国产| 久久中文字幕第一页在线| 亚洲中文字幕无码永久在线| 国产极品久久久久久久久| 性一交一乱一色一视频| 古装三级三十部在线观看| 99精品国产成人一区二区| 日本真人做爰免费视频120秒| av换脸明星一区二区三区| 在线不卡日本一区二区视频| 久久99精品国产麻豆蜜芽| 欧美日韩亚洲国产一区二区| 亚洲 日本 韩国 欧美| 阿娇囗交13分钟在线播放| 国产av一区二区三区传媒| 欧美性猛交xxxx| 自拍 角 22p 在线| 理论片87福利理论电影| 国产23p一区在线观看| 久久久久久精品无码| 国内精品久久久久久99| 国产欧美日韩精品二区特黄| 男女交性视频无遮挡全过程| 中文字幕久久久在线观看| 女人高潮叫床污话| 久久久久久9一区二区黒| 狠狠色噜噜狠狠狠狠97首创麻豆| 日本69视频在线免费观看| free紧videoxx粗又长|